Isletic Guidan Inducer Medium Kit
Isletic Guidan series PSC來源的胰島類器官誘導試劑盒
?產品是無菌的，產品外包裝是非無菌的，請在使用前對產品外包裝充分消毒；
? 產品一經拆封，應妥善存放以確保產品的無菌性；
1、 產品描述
Isletic Guidan series PSC來源的胰島類器官誘導試劑盒是一款基于人多能干細胞（PSC）定向分化的即用型、模塊化培養系統。本試劑盒經過精心優化，可在26天內，高效誘導PSC生成結構完整、功能成熟的胰島樣類器官。所產生的類器官不僅同時高表達關鍵胰腺內分泌標志物（NKX6.1、Insulin、Glucagon、Somatostatin），更具備葡萄糖刺激胰島素分泌（GSIS）的核心生理功能，為糖尿病研究、藥物篩選和細胞治療開發提供了前所未有的高效、可靠且功能完備的體外模型。
2、 產品信息
|
產品名稱 |
產品貨號 |
試劑盒組分 |
規格 |
試劑盒組分貨號 |
存儲/運輸 |
保質期 |
|
Isletic Guidan series PSC來源的胰島類器官誘導試劑盒 |
ML-0827I01 |
內胚層誘導培養基-1 Definitive Endoderm Induction Medium -1 |
15 mL |
ML-0827I01A |
-20°C |
24個月 |
|
內胚層誘導培養基-2 Definitive Endoderm Induction Medium -2 |
45 mL |
ML-0827I01B |
||||
|
原始腸管誘導培養基 Primitive Gut Tube Induction Medium |
30 mL |
ML-0827I01C |
||||
|
后前腸誘導培養基 Posterior Foregut Induction Medium |
60 mL |
ML-0827I01D |
||||
|
胰腺祖細胞誘導培養基 Pancreatic Progenitor Induction Medium |
60 mL |
ML-0827I01E |
||||
|
胰腺內分泌祖細胞誘導培養基 Pancreatic Endocrine Progenitor Induction Medium |
45 mL |
ML-0827I01F |
-20°C |
24個月 |
||
|
胰島細胞誘導培養基 Islet Cell Induction Medium |
45 mL |
ML-0827I01G |
3、 其他自備材料和試劑
a) 分化前維持干細胞培養需要使用的試劑耗材
|
產品名稱 |
產品貨號 |
|
干細胞金牌基質膠 |
082777/0827775 |
|
StemGrowth series多能干細胞金牌培養基 |
ML-0827S04 |
|
StemGrowth series 消化液 |
ML-0827S08 |
|
StemGrowth series 抗脅迫補充劑 1000x |
ML-0827S10 |
|
TC處理的6孔板 |
- |
|
TC處理的12孔板 / 24孔板 |
- |
b) 啟動分化需要使用的試劑耗材
|
產品名稱 |
產品貨號 |
|
Isletic Guidan series PSC來源的 胰島類器官誘導試劑盒 |
ML-0827I01 |
|
StemGrowth series 水解酶溫和消化液 |
ML-0827S03 |
|
超低黏附96孔U底板 |
ML-0827P12 |
|
超低黏附6孔培養皿 |
ML-0827P13 |
|
8-12通道排槍 |
- |
|
加樣槽 |
- |
|
低速離心甩板機 |
- |
|
圓周搖床 |
- |
|
高糖DMEM |
- |
4、 實驗前建議
產品是無菌的，產品外包裝是非無菌的，請在使用前對產品外包裝充分消毒。
產品一經拆封，應妥善存放以確保產品的無菌性。
5、 Mogengel推薦用細胞系
H1、H9、HN4、iPSCs帕金森患者來源DY043、iPSC-EGFP等。
6、 新手須知
注意事項：在使用時應始終穿戴防護服，在處理諸如人體細胞或其他生物及有害物質時應遵循安全的實驗室規程。在準備以下材料時，請采用無菌技術。如果準備的體積不同于所列示例中的體積，則需相應調整。
僅用于科學研究。
7、 PSC來源的胰島類器官誘導培養
注意：涉及主要人體組織材料的研究必須遵循所有相關的機構和政府法規。在收集主要人體組織材料之前，必須獲得所有受試者的知情同意。
a) 貼壁細胞啟動分化使用程序
a.1 Isletic Guidan series PSC來源的胰島類器官誘導試劑盒前提前一天解凍，解凍后應及時使用
注：配置要求注意無菌保存。
a.2 PSC細胞培養和內胚層誘導
1、 根據不同PSC細胞系的特性從ESC＜60P、iPSC＜50P中復蘇一支細胞、經過兩次高質量傳代記作復蘇后P3（干細胞培養操作見Mogengel®多能干細胞金牌培養基系列提供的PSC培養SOP）。
2、 注意！PSC克隆出現問題、自分化及漂浮的情況應再啟動復蘇擴增一株，不可直接用于分化。
3、 PSC傳代后觀測細胞形態成小島狀克隆，細胞克隆密度約為80%、無單細胞脅迫生長樣及應激態球狀克隆團即可進行誘導。棄去干細胞培養基后加入內胚層誘導培養基-1（6孔板每孔加2 mL，12孔板每孔加1 mL，24孔板每孔加0.5 mL）。
4、 24h后進行棄去內胚層誘導培養基-1培養基，加入內胚層誘導培養基-2直到細胞克隆密度達到100%后進入第二階段，第一階段誘導時間預計4天
a.3原始腸管誘導
吸棄第一階段內胚層誘導培養基后，加入原始腸管誘導培養基，每隔24h進行全換液（6孔板每孔加2 mL，12孔板每孔加1 mL，24孔板每孔加0.5 mL），持續誘導2天。
a.4后前腸誘導
吸棄第二階段原始腸管誘導培養基后，加入后前腸誘導培養基，每24h進行全換液（6孔板每孔加2 mL，12孔板每孔加1 mL，24孔板每孔加0.5 mL），持續誘導4天。
a.5胰腺祖細胞誘導
1、 后前腸誘導結束后棄去培養基，用DPBS快速洗滌細胞一遍后每孔用500 μL（12孔板用量）的Mogengel®水解酶溫和消化液/貨號: ML-0827S03消化10-15分鐘，觀測細胞變圓皺縮變亮、搖晃可見少量細胞脫離基質即可使用等量的高糖DMEM終止消化。重懸細胞后收集于15 mL或50 mL離心管中，將細胞懸液300g離心5分鐘棄除上清后，加入12 mL胰腺祖細胞誘導培養基重懸并補充1000x到1x的抗脅迫補充劑/貨號：ML-0827S10。
2、 將細胞懸液 + 1x抗脅迫補充劑加入加樣槽中或10 cm培養皿，使用排槍每孔100 μL加入超低粘附96孔U底培養板中，封口膜包好后水平甩板機1500 rpm離心2分鐘，拆掉封口膜后放37度細胞培養箱培養過夜，第二天每孔加入100 μL胰腺祖細胞誘導培養基，第三天完全吸棄培養基，加入100 μL胰腺祖細胞誘導培養基。待細胞成球后，也可選擇用寬口槍頭轉移到超低吸附/未經貼壁處理的6孔板中（需要轉移到搖床培養），方便后續換液。細胞成球后每隔48h用胰腺祖細胞誘導培養基進行全換液。在胰腺祖細胞誘導培養基持續6天后更換為胰腺內分泌祖細胞誘導培養基。
a.6胰腺內分泌祖細胞誘導
吸棄胰腺祖細胞誘導培養基后，加入胰腺內分泌祖細胞誘導培養基，每48h進行全換液（6孔板每孔加2 mL，96孔U底板加100 μL）持續誘導6天。
a.7胰島細胞誘導
吸棄胰腺內分泌祖細胞誘導培養基后，加入胰島細胞誘導培養基，每48h進行全換液（6孔板每孔加2 mL，96孔U底板加100 μL）持續誘導4天。即可用于鑒定和下游實驗。
V1.0版
更新時間：2026/1/4
